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产品概述
QuantiCyto® FLAG (DYKDDDDK)-Tag ELISA kit
不限
7.8ng/ml
15.63-1000ng/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中含FLAG(DYKDDDDK)标签的融合蛋白
本试剂盒特异性识别FLAG(DYKDDDDK)-Tag
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗人FLAG(DYKDDDDK)-Tag单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的FLAG(DYKDDDDK)-Tag会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入酶标抗体，抗FLAG(DYKDDDDK)-Tag抗体与结合在单抗上的人FLAG(DYKDDDDK)-Tag结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有FLAG(DYKDDDDK)-Tag，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值， FLAG(DYKDDDDK)-Tag浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中FLAG(DYKDDDDK)-Tag浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以随货说明书为准 | 请以随货说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩酶标抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶标抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 具腐蚀性 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶标抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 酶标抗体稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。
相关数据
标准曲线
| Dose（ng/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.072 | 0.075 | 0.074 | |
| 15.63 | 0.114 | 0.11 | 0.112 | 0.039 |
| 31.25 | 0.156 | 0.148 | 0.152 | 0.079 |
| 62.5 | 0.247 | 0.239 | 0.243 | 0.170 |
| 125 | 0.475 | 0.467 | 0.471 | 0.398 |
| 250 | 0.825 | 0.816 | 0.821 | 0.747 |
| 500 | 1.425 | 1.416 | 1.421 | 1.347 |
| 1000 | 2.310 | 2.294 | 2.302 | 2.229 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中FLAG(DYKDDDDK)的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值(ng/ml) | 774.2 | 245.3 | 82.1 | 523.8 | 152.9 | 59.7 |
| 标准差 | 58.8 | 19.4 | 6.4 | 40.3 | 12.2 | 4.8 |
| 变异系数(%) | 7.6 | 7.9 | 7.8 | 7.7 | 8.0 | 8.1 |
科研工具箱
别称
FLAG-Tag; DYKDDDDK-Tag; DYKDDDDK epitope tag
基因ID
功能
Flag(DYKDDDDK)标签蛋白是由8个氨基酸组成(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)的亲水短肽。Flag 的序列中，第二个氨基酸酪氨酸(Tyr)属于芳香族氨基酸，是抗原-抗体特异性反应的关键因素。其 N 端与带负电的天冬氨酸(Asp)相连，Asp 能辅助 Tyr 发挥抗原性。Tyr 下游的六肽序列 KDDDDK(Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)可形成高度暴露的三维结构，增强亲水性，提升 Flag 融合标签的抗原性。Flag 标签兼具多重优势：其分子量约为1 kDa且序列短小，通常不会与目的蛋白相互作用，不影响目的蛋白的结构和功能；因其亲水性Flag标签常位于融合蛋白表面，便于抗体识别；其C 端含有肠激酶识别位点 DDDDK，利于蛋白纯化后去除标签；高抗原性使其能与 M1、M2、M5 等多种抗 Flag 单克隆抗体结合。 Flag标签广泛应用于蛋白表达与纯化、蛋白质定位、蛋白质互作、药物研发等领域中。随着技术的不断发展，Flag标签蛋白将在推动药物发现、个性化医疗以及其他前沿领域中发挥越来越重要的作用。新型抗体的开发、检测方法的改进以及创新应用的涌现，将进一步巩固FLAG标签作为生物制药研究中关键工具的地位。
研究领域
免疫学；细胞生物学；蛋白表达；蛋白互作
