产品概述
QuantiCyto® Human Calprotectin (S100A8/S100A9 Heterodimer) ELISA kit
Human
0.16ng/ml
0.31-20ng/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Calprotectin浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Calprotectin
/
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Calprotectin单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Calprotectin会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Calprotectin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Calprotectin抗体与结合在单抗上的人Calprotectin结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Calprotectin,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450nm处测OD值,人Calprotectin浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人Calprotectin的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以随货说明书为准 | 请以随货说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 具腐蚀性 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃保存,请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 |
未用完的板条放回带拉链铝箔袋,密封好。 4℃条件下可储存1个月左右。 |
| 标准品 |
冻干粉 -20℃可储存6个月左右。 复溶后标准品使用后立即丢弃。 |
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| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液 4℃可储存1个月左右,稀释后即用即弃。 | |
| 浓缩酶结合物(避光) | ||
| 标准品&标本通用稀释液 |
4℃条件下,可储存 1 个月左右。 开瓶后密封好防止污染。 |
|
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物(避光) | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液 20× |
备注:所有试剂的批号见标签。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose(ng/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.083 | 0.081 | 0.082 | |
| 0.31 | 0.158 | 0.152 | 0.155 | 0.073 |
| 0.63 | 0.206 | 0.201 | 0.204 | 0.122 |
| 1.25 | 0.297 | 0.288 | 0.293 | 0.211 |
| 2.5 | 0.490 | 0.479 | 0.485 | 0.403 |
| 5 | 0.808 | 0.797 | 0.803 | 0.721 |
| 10 | 1.399 | 1.381 | 1.390 | 1.308 |
| 20 | 2.264 | 2.244 | 2.254 | 2.172 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Calprotectin(S100A8/S100A9 Heterodimer)的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 平均值(ng/ml) | 13.5 | 4.4 | 0.8 | 9.6 | 3.1 | 0.5 |
| 标准差 | 1.08 | 0.36 | 0.06 | 0.78 | 0.26 | 0.04 |
| 变异系数(%) | 8.0 | 8.2 | 7.9 | 8.1 | 8.3 | 8.2 |
科研工具箱
别称
S100A8; S100A9; S100 Calcium Binding Protein A8/S100 Calcium Binding Protein A9
基因ID
Gene ID: 6279
功能
钙卫蛋白(Calprotectin)是由S100A8和S100A9构成的异源二聚体,属于S100家族的钙结合蛋白,S100蛋白家族是哺乳动物中最大的Ca²⁺结合蛋白亚家族,其成员在细胞增殖、分化、迁移及炎症反应中发挥关键作用。S100A8和S100A9是该家族的代表成员,在粒细胞(尤其是中性粒细胞)中极为丰富,均含有两个EF-hand钙结合基序。其中C端的EF-hand为经典基序,对Ca²⁺亲和力较高;N端EF-hand为非经典基序,亲和力较低。钙卫蛋白的独特之处在于其界面上形成的过渡金属结合位点。通过组氨酸残基的配位,该蛋白能够高亲和力结合 Zn²⁺ 和 Mn²⁺,甚至 Fe²⁺,从而剥夺病原微生物生长所必需的微量金属元素,实现抗菌功能。此外,S100A9特有的C端尾部还参与了花生四烯酸的结合,提示其在炎症介质代谢中的潜在作用。 研究表明,S100A8和S100A9各自均具有淀粉样聚集倾向。在体外,S100A8形成球形寡聚体,S100A9形成纤维,两者均能结合硫黄素T(ThT),并伴随β-折叠结构的增加。在神经退行性疾病如阿尔茨海默病中,S100A9已被发现与Aβ和tau蛋白共聚集,并小胶质细胞中表达上调。钙卫蛋白的异常聚集可能通过诱导神经炎症、促进氧化应激及影响钙稳态加速疾病进展。目前,钙卫蛋白已被广泛应用于临床,尤其在炎症性肠病中作为粪便标志物,此外,其在类风湿性关节炎、心血管疾病、COVID-19、多种癌症及阿尔茨海默病中也显示出作为诊断和预后标志物的巨大潜力。
研究领域
神经科学;免疫学;心血管生物学;癌症生物学
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