产品概述
QuantiCyto® Human Caspase 1 ELISA kit
Human
0.78ng/ml
1.56-100ng/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Caspase 1 浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Caspase 1
与以下细胞因子无明显交叉反应:Human Caspase-2,Caspase-3,Caspase-7,Caspase-8,IL-1α,IL-1β和Mouse IL-1β
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人 Caspase 1单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Caspase 1会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Caspase 1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Caspase 1抗体与结合在单抗上的人Caspase 1结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Caspase 1,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人Caspase 1浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人Caspase 1的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。
相关数据
标准曲线
Dose(ng/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.081 | 0.085 | 0.083 | |
1.56 | 0.110 | 0.118 | 0.114 | 0.031 |
3.125 | 0.212 | 0.218 | 0.215 | 0.132 |
6.25 | 0.297 | 0.309 | 0.303 | 0.220 |
12.5 | 0.440 | 0.452 | 0.446 | 0.363 |
25 | 0.744 | 0.754 | 0.749 | 0.666 |
50 | 1.251 | 1.263 | 1.257 | 1.174 |
100 | 2.264 | 2.272 | 2.268 | 2.185 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Caspase 1的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 16 | 16 | 16 | 8 | 8 | 8 |
平均值(ng/ml) | 76.1 | 46.8 | 10.3 | 61.2 | 30.6 | 9.7 |
标准差 | 6.01 | 3.56 | 0.83 | 4.59 | 2.23 | 0.76 |
变异系数(%) | 7.9 | 7.6 | 8.1 | 7.5 | 7.3 | 7.8 |
科研工具箱
别称
CASP1 nirs variant 1; CASP1; CASP-1; Caspase-1 subunit p10; Caspase-1 subunit p20; ICE; IL-1 beta-converting enzyme; IL1BC; IL1B-convertase; p45
基因ID
Gene ID: 834
功能
Caspase是参与细胞凋亡的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶家族,成员较多。在人类,已经鉴定了11种不同的半胱氨酸蛋白酶,根据其蛋白酶序列的同源性可分为3个亚族:Caspase-1亚族(Caspase-1、4、5、11、12);Caspase-2亚族(Caspase-2、9)和Caspase-3亚族(Caspase-3、6、7、8、10)。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1),又称为白介素1β转化酶(ICE, IL-1β-converting enzyme)。与其他半胱天冬酶相同,Caspase-1 作为一种无活性的酶原被合成,通过酶原蛋白水解被激活,产生一个由两个大亚基(~20 kDa)和两个小亚基(~10 kDa)组成的四聚体,活性酶包含两个活性位点。成熟的人Caspase-1包含404个氨基酸残基,在大亚基中,人Caspase-1与小鼠、大鼠Caspase-1具有61%的氨基酸序列同一性。人Caspase-1 在脾和肺中表达量较大。在肝脏、心脏、小肠、结肠、胸腺、前列腺、骨骼肌、外周血白细胞、肾脏和睾丸中均可检测到,在大脑中没有表达。 Caspase-1是NLRP3炎性小体的效应蛋白,具有促炎性。活化的Caspase-1通过对pro-IL-1β等炎性因子的前体进行加工修饰,促进其成熟、分泌,其强大的促炎作用可直接影响宿主对感染和损伤的固有免疫调节过程。Caspase-1被激活后激活白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)以及Gasdermin D (GSDMD)介导的细胞焦亡。被Caspase-1激活的两种炎症细胞因子会从细胞中排出,进一步诱发邻近细胞的炎症反应,杀灭病原体。在GSDMD缺失的情况下,Caspase-1通过Bid-caspase-9-caspase-3轴诱导细胞凋亡,进而引起GSDME/DFNA5介导的继发性坏死/焦亡。Caspase-1参与启动炎症反应的性质,使成为抑制其活性的有吸引力的靶点。Caspase-1抑制剂有抑制炎症反应的潜力。
研究领域
细胞生物学;癌症生物学;代谢生物学