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产品概述
QuantiCyto® Human Complement Component C5a ELISA kit
Human
15.6pg/ml
31.25-2000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Complement Component C5a浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Complement Component C5a
与以下蛋白无明显交叉反应：重组Human Complement Component C3a；重组小鼠Human Complement Component C3a和C5a；天然α2-macroglobulin
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗人Complement Component C5a单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的人Complement Component C5a会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Complement Component C5a抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗人Complement Component C5a抗体与结合在单抗上的人Complement Component C5a结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有人Complement Component C5a，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，人Complement Component C5a浓度与OD451值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人Complement Component C5a的浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以随货说明书为准 | 请以随货说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
文件下载
实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.082 | 0.085 | 0.084 | |
| 31.25 | 0.113 | 0.108 | 0.111 | 0.027 |
| 62.5 | 0.123 | 0.117 | 0.120 | 0.037 |
| 125 | 0.169 | 0.16 | 0.165 | 0.081 |
| 250 | 0.252 | 0.241 | 0.247 | 0.163 |
| 500 | 0.459 | 0.445 | 0.452 | 0.369 |
| 1000 | 1.118 | 1.106 | 1.112 | 1.029 |
| 2000 | 2.502 | 2.487 | 2.495 | 2.411 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Complement Component C5a的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 平均值(pg/ml) | 1325.8 | 623.8 | 130.4 | 1012.5 | 311.2 | 77.1 |
| 标准差 | 102.1 | 49.9 | 10.3 | 77.0 | 24.3 | 6.2 |
| 变异系数(%) | 7.7 | 8.0 | 7.9 | 7.6 | 7.8 | 8.1 |
科研工具箱
别称
C5; He; C5a; Complement C5
基因ID
Gene ID: 727
功能
人补体成分5a(Complement Component 5a, C5a)是由C5转化酶切割补体成分C5α链后产生的一个由74个氨基酸组成的多肽，属于过敏毒素(anaphylatoxin)。人C5a包含四个α螺旋，并通过三条链内二硫键形成一种三环状结构。人C5a与小鼠和大鼠C5a的氨基酸序列同源性分别为60%和54%。 C5a在免疫机制中具有强大的生物活性，其核心生理功能是作为强效的炎症介质和趋化因子，能够招募并激活多种免疫细胞，包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞，增强它们的吞噬和杀伤能力。C5a通过与两种受体结合来发挥其生物学作用：一是经典G蛋白偶联受体C5aR(CD88)，C5a与其结合后，触发下游复杂的信号转导通路，导致细胞内钙离子动员、产生活性氧(ROS)以及释放颗粒酶和促炎因子（如IL-6、IL-1β等），从而促进多种炎症反应；二是非G蛋白偶联受体C5L2。作为过敏毒素，C5a还能导致内皮细胞上粘附分子的表达增加、平滑肌收缩以及血管通透性增加，调节白细胞上激活与抑制性IgG Fc受体之间的平衡，增强自身免疫反应。 作为一种关键的炎症介质，C5a的异常激活是许多慢性炎症性疾病和免疫性疾病的关键驱动因子，如脓毒症、缺血-再灌注损伤以及类风湿性关节炎等。基于其强烈的促炎特性，C5a及其受体C5aR已被视为药物研发的理想靶点。
研究领域
免疫学；代谢生物学
