产品概述
QuantiCyto® Human Cytokeratin 18/KRT18/CK18 ELISA kit
Human
0.16ng/ml
0.31-20ng/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Cytokeratin 18浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Cytokeratin 18
/
欣博盛QuantiCyto®ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Cytokeratin 18单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的Cytokeratin 18会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入酶标抗体,抗人Cytokeratin 18抗体与结合在单抗上的人Cytokeratin 18结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有Cytokeratin 18辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450nm处测OD值,Cytokeratin 18浓度与OD450值之间呈正相关关系,可通过绘制标准曲线求出标本中Cytokeratin 18浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以随货说明书为准 | 请以随货说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩酶标抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
| 酶标抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶标抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 酶标抗体稀释液 | ||
| 显色底物(避光) | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存;若条件不足,也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose(ng/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.047 | 0.05 | 0.049 | |
| 0.31 | 0.096 | 0.091 | 0.094 | 0.045 |
| 0.63 | 0.141 | 0.132 | 0.137 | 0.088 |
| 1.25 | 0.227 | 0.217 | 0.222 | 0.174 |
| 2.5 | 0.404 | 0.387 | 0.396 | 0.347 |
| 5 | 0.725 | 0.710 | 0.718 | 0.669 |
| 10 | 1.356 | 1.346 | 1.351 | 1.303 |
| 20 | 2.430 | 2.412 | 2.421 | 2.373 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Cytokeratin 18/ KRT18/ CK18的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值(ng/ml) | 15.53 | 4.72 | 1.18 | 11.84 | 3.33 | 0.61 |
| 标准差 | 1.23 | 0.38 | 0.10 | 0.92 | 0.27 | 0.05 |
| 变异系数(%) | 7.9 | 8.0 | 8.1 | 7.8 | 8.1 | 8.2 |
科研工具箱
别称
CK-18; CYK18; Keratin 18; KRT18
基因ID
Gene ID: 3875
功能
人细胞角蛋白18(Cytokeratin 18),简称CK18或KRT18,是一种I型(酸性)中间丝蛋白,分子量约45kDa;由位于染色体12q13.13上的KRT18基因编码,全长3791个碱基对,主要存在于细胞质和核周区域。正常情况下,CK18在单层上皮细胞(如腺上皮)中高表达,复层鳞状上皮通常不表达。在肝脏、阑尾等组织中表达显著。这种酸性蛋白含有一个中央螺旋杆状结构域,两侧分别为 N 端头部和 C 端尾部区域,并与 II 型中间丝蛋白细胞角蛋白-8(CK8)共表达。 CK18的主要生物学功能是维持细胞完整性。它与CK8 II型角蛋白形成异二聚体,构成肝脏、肠道、胰腺等简单上皮细胞中的主要细胞骨架网络,这一丝状网络提供细胞结构完整性和韧性,能够承受机械和非机械性应激,例如药物性肝损害(DILI)过程中遇到的应激。此外,CK18还参与多种信号通路的调控,如PI3K/Akt、ERK MAPK、Wnt信号通路。 CK18与多种肝脏疾病及上皮源性肿瘤的发生发展密切相关。在遗传层面,CK18基因突变(如His127Leu)已被证实与隐源性肝硬化有关;肝细胞中CK18的突变或功能异常会导致肝脏病变。在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和DILI等慢性肝病中,CK18作为一种潜在生物标志物,可用于评估肝脏炎症和纤维化的严重程度。同时,CK18也可作为多种癌症的诊断标志物。研究表明,在小细胞肺癌、胰腺癌等癌症中CK18的表达上调;在乳腺癌中,CK18表达的改变可以反映疾病进展。未来,基于CK18及其片段的检测有望进一步标准化并纳入临床指南,作为肝活检的有力替代工具;同时,通过调节CK18与凋亡/炎症信号通路的相互作用,可能为肝纤维化和上皮源性肿瘤提供新的治疗策略。
研究领域
细胞生物学;癌症生物学
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