产品概述
QuantiCyto® Mouse IL-12p70 ELISA kit (High Sensitivity)
Mouse
3.9pg/ml
7.8-500pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Mouse IL-12p70浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Mouse IL-12p70
不与重组小鼠IL-6, IL-6Rα, IL-23, IL-27, G-CSF, gp130等反应
欣博盛QuantiCyto®ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗小鼠IL-12p70单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的小鼠IL-12p70会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗小鼠IL-12p70抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗小鼠IL-12p70抗体与结合在单抗上的小鼠IL-12p70结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有小鼠IL-12p70,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,小鼠IL-12p70浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠IL-12p70的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存;若条件不足,也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。
相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.059 | 0.060 | 0.060 | |
7.8 | 0.110 | 0.107 | 0.109 | 0.049 |
15.6 | 0.162 | 0.156 | 0.159 | 0.100 |
31.3 | 0.253 | 0.248 | 0.251 | 0.191 |
62.5 | 0.444 | 0.437 | 0.441 | 0.381 |
125 | 0.816 | 0.808 | 0.812 | 0.753 |
250 | 1.463 | 1.452 | 1.458 | 1.398 |
500 | 2.363 | 2.352 | 2.358 | 2.298 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中小鼠IL-12p70的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 8 | 8 | 8 | 10 | 10 | 10 |
平均值(pg/ml) | 422.8 | 81.0 | 22.9 | 324.8 | 66.4 | 17.3 |
标准差 | 32.6 | 6.4 | 1.9 | 24.7 | 5.2 | 1.4 |
变异系数(%) | 7.7 | 7.9 | 8.1 | 7.6 | 7.8 | 8.0 |
科研工具箱
别称
CLMF p35;CLMF p40;Cytotoxic lymphocyte maturation factor 35 kDa subunit;Cytotoxic lymphocyte maturation factor 40 kDa subunit;IL 12A;IL 12B;IL12 subunit p35;IL12 subunit p40;Interleukin 12 alpha chain;Interleukin 12 beta chain
基因ID
Gene ID: 16159(Mouse); Gene ID: 16160(Mouse)
功能
白介素12是一种具多效性的细胞因子,最初命名为细胞毒淋巴细胞成熟因子(Cytotoxic lymphocyte maturation factor, CLMF)或天然杀伤细胞激活因子(Natural Killer cell Stimulatory Factor, NKSF),主要由激活的巨噬细胞产生。研究表明IL-12参与了初始T细胞向Th1细胞的分化,它被称为T细胞刺激因子,可以刺激T细胞的生长和功能。IL-12能刺激T细胞和自然杀伤(Natural killer, NK)细胞产生干扰素(Interferon, IFN)-γ和肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor, TNF)-α,并减少IL-4介导的对IFN-γ的抑制。除促进Th1细胞发育和促进细胞溶解活性外,IL-12还具有抗血管生成活性,这意味着它可以阻止新血管的形成。IL-12通过诱导IFN-γ的产生,从而促进一种名为诱导蛋白(Inducible protein, IP)-10/CXCL10的趋化因子的生成,IP-10可以介导这种抗血管生成效应。由于其诱导免疫反应和抗血管生成的能力,IL-12被认为可能用作抗癌药物进行测试。然而,到目前为止,它在已测试的肿瘤中尚未显示出显著的活性。IL-12是由二硫桥连接的异源二聚体细胞因子,由一个35kDa的轻链(p35)和一个40kDa的重链(p40)组成,只有70kDa(p70)的IL-12具有生物学活性。P40亚基亦能形成同源二聚体,且能与IL-12受体结合,因而作为IL-12的拮抗剂发挥作用。此外,研究发现p40亚基较p70亚基的表达量为高。
研究领域
免疫学;癌症生物学;神经生物学