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产品概述
QuantiCyto® Rabbit TNF-α ELISA kit
Rabbit
31.3pg/ml
62.5-4000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Rabbit TNF-α浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Rabbit TNF-α
与以下蛋白无明显交叉反应：Recombinant TNF-α from Human, Mouse, Rat, Cotton rat, Bovine, Canine, Equine, Feline, Porcine, Guinea pig, Rhesus macaque
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗兔TNF-α单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的兔TNF-α会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗兔TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗兔TNF-α抗体与结合在单抗上的兔TNF-α结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有兔TNF-α，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，兔TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中兔TNF-α的浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以随货说明书为准 | 请以随货说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.082 | 0.086 | 0.084 | |
| 62.5 | 0.176 | 0.169 | 0.173 | 0.089 |
| 125 | 0.257 | 0.244 | 0.251 | 0.167 |
| 250 | 0.432 | 0.414 | 0.423 | 0.339 |
| 500 | 0.692 | 0.681 | 0.687 | 0.603 |
| 1000 | 1.030 | 1.021 | 1.026 | 0.942 |
| 2000 | 1.510 | 1.499 | 1.505 | 1.421 |
| 4000 | 2.251 | 2.235 | 2.243 | 2.159 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中兔TNF-α的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 16 | 16 | 16 | 12 | 12 | 12 |
| 平均值(pg/ml) | 3123.4 | 885.2 | 188.3 | 2124.7 | 601.3 | 137.1 |
| 标准差 | 246.7 | 70.8 | 15.3 | 165.7 | 47.5 | 11.2 |
| 变异系数(%) | 7.9 | 8.0 | 8.1 | 7.8 | 7.9 | 8.2 |
科研工具箱
别称
APC1 protein; Cachectin; Cachetin; DIF; TNF; TNFA; TNF-A; TNFalpha; TNF-alpha; TNFG1F; TNFSF1A; TNFSF2; tumor necrosis factor alpha; Tumor necrosis factor ligand superfamily member 2; tumor necrosis factor; tumor necrosis factor-alpha
基因ID
Gene ID: 100009088
功能
肿瘤坏死因子α (Tumor necrosis factor alpha, TNF-α)，又称为恶病质素(cachectin)或TNFSF2，属于肿瘤坏死因子超家族。TNF-α是一种多功能促炎性细胞因子，在炎症、免疫系统发育、细胞凋亡和脂质代谢中发挥核心作用。兔TNF-α包含一个35个氨基酸的胞质结构域、一个21个氨基酸的跨膜区段和一个179个氨基酸的胞外结构域。在胞外结构域中，兔TNF-α与多种哺乳动物（包括人、小鼠、犬、牛等）的TNF-α具有较高的序列同源性（约76%-83%）。TNF-α主要由活化的免疫细胞（如巨噬细胞、单核细胞、T淋巴细胞）产生，某些条件下的上皮细胞、内皮细胞以及部分肿瘤细胞也能分泌TNF-α。其在细胞内组装形成非共价连接的同源三聚体，并表达于细胞表面。膜结合型TNF-α经TACE/ADAM17蛋白酶切割后，释放出具有生物活性的可溶性三聚体TNF-α。 TNF-α通过与1型和2型TNF受体（TNF-R1和TNF-R2）结合，介导其生物活性。TNF-R1在几乎所有有核细胞上组成型表达，其胞内死亡结构域可招募多种衔接蛋白，进而激活NF-κB、凋亡及坏死性凋亡等多条下游通路。而TNF-R2的表达则较为受限，主要见于免疫细胞和内皮细胞等，其信号转导依赖于募集由TRAF2、TRAF1、cIAP1/2等组成的复合物，进而强效激活NF-κB通路，在免疫调节中发挥重要作用。两者在细胞表面通常以单体或低聚形式存在，结合TNF-α三聚体后发生受体聚集，从而启动下游信号。TNF-α在中性粒细胞活化、细胞凋亡通路激活、氧化应激、下丘脑-垂体-肾上腺轴激活以及肠道转运功能改变等多种生理和病理过程中发挥关键作用。目前已有多种抗TNF-α药物被开发用于炎症性疾病的临床治疗，包括靶向TNF-α的单抗药物以及重组TNF受体-Fc融合蛋白药物。
研究领域
免疫学；信号转导；干细胞与再生医学；微生物学；癌症生物学；心血管生物学；神经科学；代谢生物学
