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产品概述
QuantiCyto® Rat RANTES/CCL5 ELISA kit
Rat
3.9pg/ml
7.8-500pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Rat RANTES/CCL5浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组大鼠RANTES
不与大鼠MCP-1、MIP-1α 、MIP-1β反应
欣博盛QuantiCyto®ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗大鼠RANTES单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的大鼠RANTES会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗大鼠RANTES抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗大鼠RANTES抗体与结合在单抗上的大鼠RANTES结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有大鼠RANTES，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值，大鼠RANTES浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中大鼠RANTES的浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。
相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.049 | 0.051 | 0.050 | |
| 7.8 | 0.186 | 0.182 | 0.184 | 0.134 |
| 15.6 | 0.283 | 0.278 | 0.281 | 0.231 |
| 31.25 | 0.478 | 0.469 | 0.474 | 0.424 |
| 62.5 | 0.751 | 0.745 | 0.748 | 0.698 |
| 125 | 1.182 | 1.175 | 1.179 | 1.129 |
| 250 | 1.765 | 1.757 | 1.761 | 1.711 |
| 500 | 2.290 | 2.280 | 2.285 | 2.235 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中大鼠RANTES/CCL5的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 24 | 24 | 24 | 16 | 16 | 16 |
| 平均值(pg/ml) | 408.9 | 89.3 | 33.8 | 278.5 | 69.2 | 21.4 |
| 标准差 | 31.1 | 7.0 | 2.7 | 22.0 | 5.3 | 1.7 |
| 变异系数(%) | 7.6 | 7.8 | 8.0 | 7.9 | 7.7 | 8.1 |
科研工具箱
别称
chemokine (C-C motif) ligand 5; EoCP; Eosinophil chemotactic cytokine; SISd; SIS-delta; Small-inducible cytokine A5; T cell-specific protein P228; T-cell specific protein p288; TCP228
基因ID
Gene ID: 81780
功能
RANTES，调节活化的正常T细胞表达和分泌的因子(regulated on activation, normal T-cell expressed and secreted)，也称为趋化因子配体5(chemokineligand 5,CCL5)，属于趋化因子“CC”亚家族。RANTES通过趋化白细胞并调控它们的功能，在炎症免疫应答中发挥重要作用。RNATES cDNA最初是通过抑制差减杂交法而鉴定出的T细胞特异性序列。人RANTES cDNA编码91个氨基酸残基多肽前体分子，含有23个氨基酸残基的疏水信号肽，经剪切后产生一个68氨基酸残基的成熟蛋白。人RANTES与小鼠RANTES推测序列大约具有85%的同源性。 RANTES对多种不同类型的细胞具有强的趋化作用，包括未刺激的CD4+/CD45RO+记忆性T细胞、活化的CD4+T细胞、NK细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞、单核细胞和小胶质细胞。除其趋化作用外，RANTES也能活化多种类型的细胞包括T细胞、单核细胞、中性粒细胞、NK细胞、树突状细胞和星形胶质细胞。T细胞的激活可受到RANTES的调节，其功能部分依赖于与细胞表面糖胺聚糖(GAGs)的结合。RANTES在高浓度下易形成聚集体，与GAGs结合可增强其局部活性浓度，从而促进T细胞的激活。目前已鉴定出4个RANTES受体CCR1、CCR3、CCR4和CCR5，均为G蛋白偶联受体。RANTES活化可激活多条信号传导级联。比如在T细胞内，RABNTES可激活胞内Ca2+升高，活化FAK激酶、蛋白激酶A、PI3K激酶、RhoGTP酶和JAK/STAT信号通路。巨细胞病毒蛋白US28与CC趋化因子受体具有高度的同源性，可与RNATES结合。
研究领域
免疫学;心血管生物学;神经科学
