产品概述
QuantiCyto® Human CD28 ELISA kit
Human
0.078ng/ml
0.156-10ng/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human CD28浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组人CD28
与以下细胞因子等无明显交叉反应:人B7-1,B7-2,CTLA-4,CD40 Ligand和小鼠MPO
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人CD28单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人CD28会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人CD28抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人CD28抗体与结合在单抗上的人CD28结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人CD28,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人CD28浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人CD28的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。
相关数据
标准曲线
Dose(ng/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.063 | 0.069 | 0.066 | |
0.156 | 0.103 | 0.109 | 0.106 | 0.04 |
0.313 | 0.132 | 0.138 | 0.135 | 0.069 |
0.625 | 0.243 | 0.247 | 0.245 | 0.179 |
1.25 | 0.417 | 0.421 | 0.419 | 0.353 |
2.5 | 0.695 | 0.701 | 0.698 | 0.632 |
5 | 1.211 | 1.219 | 1.215 | 1.149 |
10 | 2.294 | 2.308 | 2.301 | 2.235 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人CD28的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 16 | 16 | 16 | 8 | 8 | 8 |
平均值(ng/ml) | 7.6 | 2.3 | 0.8 | 6.8 | 2.1 | 0.4 |
标准差 | 0.57 | 0.18 | 0.06 | 0.55 | 0.15 | 0.03 |
变异系数(%) | 7.5 | 7.9 | 7.3 | 8.1 | 7.2 | 7.7 |
科研工具箱
别称
Tp44; CD28 antigen; CD28 molecule; MGC138290; T-cell-specific surface glycoprotein CD28
基因ID
Gene ID: 940
功能
CD28分子又称为Tp44,是免疫球蛋白超家族成员之一 ,是由二硫键连接的同源二聚体表面糖蛋白,成熟的人CD28分子包含220个氨基酸残基。CD28表达于大多数T细胞、胸腺细胞、浆细胞、自然杀伤细胞和激活的B细胞。CD28分子在许多T细胞过程中起着关键作用,包括细胞骨架重塑,细胞因子产生,存活和分化等。T细胞激活需要T细胞受体(TCR)识别MHC分子环境中存在的抗原,而CD28是一种T细胞协同刺激受体,CD28与其配体CD80(B7-1)或CD86(B7-2)的相互作用可提供初始T细胞激活所需的第二信号。在没有CD28刺激的情况下,激活初始T细胞会导致出现T细胞无能或无反应的状态。CD28和CTLA-4具有高度的同源性,它们具有相同的配体,CD28负责传递激活信号,活化T细胞,而CTLA-4负责传递抑制信号给T细胞。近年研究表明,CD28/B7共刺激途径对有效的PD-1疗法至关重要,TCR共刺激受体CD28是PD-1信号传导的主要目标。早年针对CD28靶点设计的药物由于激活后导致了严重因子风暴副作用,该靶点的研究降至冰点。近两年,有药物研发公司启动了CD38/CD28/CD3三特异性抗体药物的研究。CD28三抗在临床研究上显示出巨大的潜力,三特异性抗体有望为抗癌免疫治疗提供一条新出路。
研究领域
免疫学;癌症生物学