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产品概述
QuantiCyto® Human Proinsulin ELISA kit
Human
2.0pg/ml
3.91-250pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组人Proinsulin浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Proinsulin
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗人Proinsulin单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的人Proinsulin会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Proinsulin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗人Proinsulin抗体与结合在单抗上的人Proinsulin结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有人Proinsulin，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，人Proinsulin浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人Proinsulin的浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。
相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.045 | 0.050 | 0.048 | |
| 3.91 | 0.126 | 0.120 | 0.123 | 0.076 |
| 7.81 | 0.171 | 0.164 | 0.168 | 0.120 |
| 15.63 | 0.271 | 0.263 | 0.267 | 0.220 |
| 31.25 | 0.463 | 0.453 | 0.458 | 0.411 |
| 62.5 | 0.785 | 0.778 | 0.782 | 0.734 |
| 125 | 1.378 | 1.365 | 1.372 | 1.324 |
| 250 | 2.310 | 2.297 | 2.304 | 2.256 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Proinsulin的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 平均值(pg/ml) | 165.6 | 48.3 | 11.2 | 132.1 | 34.8 | 8.1 |
| 标准差 | 12.9 | 3.7 | 0.9 | 10.4 | 2.7 | 0.6 |
| 变异系数（%） | 7.8 | 7.6 | 8.1 | 7.9 | 7.7 | 8.0 |
科研工具箱
别称
ILPR; IRDN; Proinsulin; Proinsulin precursor
基因ID
Gene ID: 3630
功能
胰岛素原(Proinsulin)是胰岛素的前体物质，由胰岛β细胞分泌，在人体中由INS基因编码而成。在裂解成成熟胰岛素之前，它是细胞分泌的最终单链蛋白结构。胰岛素原由芝加哥大学的Donald F. Steiner教授在1967年发现。 胰岛素原由胰岛β细胞合成并释放，这是胰岛素生物合成的关键步骤。胰岛素原mRNA在胰岛β细胞中稳定表达，且在血糖水平升高等刺激下将增加合成。在细胞内，分泌出的胰岛素原经专一性蛋白酶——胰岛素原转化酶（PC1和PC2）和羧肽脢E的作用，将胰岛素原中间部分（C肽）切下，而胰岛素原的羧基端部分（A链）和氨基端部分（B链）通过二硫键结合在一起，最终形成胰岛素，随后分泌到血液中。胰岛素原与胰岛素受体的相互作用能特异性地激活细胞内信号传导途径，从而激活下游的代谢途径。胰岛素原的生物活性可被特定的抗体或小分子抑制剂所阻断。胰岛素原的裂解和成熟过程是胰岛素信号传导的基础，对于维持血糖稳态至关重要。 许多与胰岛素相关的代谢性疾病的研究重点都集中在成熟的胰岛素上。近年来，胰岛素原研究的重要性已经变得日益明显。循环系统中胰岛素原相对于成熟胰岛素浓度的增加可能预示着胰岛素抵抗和2型糖尿病的发展。新生儿体内的胰岛素原浓度对眼睛神经的正常发育、心脏的发育以及胚胎细胞的总体存活起到重要作用。因此，胰岛素原不仅是胰岛素生物合成的关键分子，也是糖尿病研究和治疗的重要靶点。
研究领域
信号转导;心血管生物学;代谢生物学;神经科学
