产品概述
QuantiCyto® Human Perforin ELISA kit
Human
19.5pg/ml
39-2500pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组 Human Perforin 浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组 Human Perforin
不与重组人IL-1β,IL-2,IL-3,IFN-γ,TNFα,Fas,Fas-L, TRAIL等反应
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Perforin单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Perforin会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Perforin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Perforin抗体与结合在单抗上的人Perforin结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Perforin,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人Perforin浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人Perforin的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存;若条件不足,也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。
相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.055 | 0.052 | 0.054 | |
39.00 | 0.101 | 0.103 | 0.102 | 0.049 |
78.1 | 0.142 | 0.145 | 0.144 | 0.090 |
156.25 | 0.233 | 0.241 | 0.237 | 0.184 |
312.5 | 0.415 | 0.422 | 0.419 | 0.365 |
625 | 0.697 | 0.701 | 0.699 | 0.646 |
1250 | 1.225 | 1.348 | 1.287 | 1.233 |
2500 | 2.112 | 2.222 | 2.167 | 2.114 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Perforin的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
平均值(pg/ml) | 1521.9 | 304.1 | 108.4 | 1284.8 | 295.6 | 101.2 |
标准差 | 114.14 | 21.59 | 8.24 | 100.21 | 21.87 | 7.99 |
变异系数(%) | 7.5 | 7.1 | 7.6 | 7.8 | 7.4 | 7.9 |
科研工具箱
别称
P1; PFP; HPLH2; FLH2; Cytolysin; PGFL; PLGF
基因ID
Gene ID: 5551
功能
穿孔素(Perforin),又称PRF或PRF1。人的Perforin信号肽为20个氨基酸,经过内质网的加工后,释放成熟的Perforin,其溶细胞活性主要位于N端的前34个氨基酸上。Perforin的结构和功能与补体成分9(C9)相似,可形成跨膜小管,非特异性的溶解多种靶细胞。Perforin是溶细胞颗粒中主要的溶细胞蛋白,是T细胞和自然杀伤细胞调节的溶细胞作用的主要效应分子。Perforin主要存在于细胞毒性T细胞(CTLs)和NK细胞,这些细胞脱颗粒后Perforin插入靶细胞的细胞膜形成小孔,Perforin插入细胞膜溶细胞的区域为MACPF,这个区域与革兰氏阳性菌来源的胆固醇依赖性融细胞素同源。
研究领域
免疫学