产品概述
QuantiCyto® Human Leptin ELISA kit
Human
15.6pg/ml
31.25-2000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Leptin浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Leptin
不与AR,CNTF,EGF,Epo,FGF,G-CSF,GRO,M-CSF, MCP-1,OSM,PDGF,RANTES等反应
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Leptin单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Leptin会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Leptin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Leptin抗体与结合在单抗上的人Leptin结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Leptin,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人Leptin浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人Leptin的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。
相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.076 | 0.078 | 0.077 | |
31.25 | 0.157 | 0.161 | 0.159 | 0.082 |
62.5 | 0.210 | 0.208 | 0.209 | 0.132 |
125 | 0.299 | 0.311 | 0.305 | 0.228 |
250 | 0.481 | 0.483 | 0.482 | 0.405 |
500 | 0.801 | 0.784 | 0.793 | 0.716 |
1000 | 1.296 | 1.287 | 1.292 | 1.215 |
2000 | 2.221 | 2.098 | 2.160 | 2.083 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Leptin的含量。
重复性
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
平均值(pg/ml) | 1037.2 | 448.9 | 195.4 | 1013.9 | 439.2 | 193.3 |
标准差 | 86.09 | 35.46 | 15.83 | 84.15 | 35.58 | 15.85 |
变异系数(%) | 8.3 | 7.9 | 8.1 | 8.3 | 8.1 | 8.2 |
科研工具箱
别称
LEPD, OB, OBS, Obese protein, Obesity factor
基因ID
Gene ID: 3952
功能
Leptin 是新近鉴定出的小鼠 obese 肥胖基因的蛋白产物。obese 肥胖基因突变的小鼠,Leptin 的合成受阻,出现肥胖和糖尿病以及代谢率和体温降低等症状。目前已从人类、猿、小鼠和大鼠等细胞中分离到编码 leptin 的 cDNA 克隆。人 Leptin 与小鼠 Leptin 的氨基酸序列具有 84%的序列同一性。人 Leptin 的 cDNA 编码 167 个氨基酸残基,其中 21 个氨基酸残基作为信号肽而被剪切,产生 146 氨基酸残基的成熟蛋白质。研究发现 Leptin 的 mRNA 仅表达于脂肪组织。最近又克隆出与 Leptin 具高亲和力的受体(OB-R),该受体与 gp130 和G-CSF受体同源。OB-R的mRNA主要表达于脉络丛和下丘脑。OB-R亦被鉴定为 B219 的一种同工型蛋白,B219 序列在原始造血细胞群和淋巴造血细胞系中至少以 4 种同工型表达。目前正对 leptin 在体重调节、造血及生殖等方面的作用进行广泛的研究。
研究领域
信号转导;神经科学;干细胞与再生医学;心血管生物学;代谢生物学