产品概述
QuantiCyto® Human Osteoprotegerin/TNFRSF11B ELISA kit
Human
31.25pg/ml
62.5-4000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Osteoprotegerin/TNFRSF11B浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Osteoprotegerin/TNFRSF11B
与人CD40, TNF RI和TNF RII没有交叉反应
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Osteoprotegerin/TNFRSF11B单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Osteoprotegerin/TNFRSF11B会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Osteoprotegerin/TNFRSF11B抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Osteoprotegerin/TNFRSF11B抗体与结合在单抗上的人Osteoprotegerin/TNFRSF11B结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Osteoprotegerin/TNFRSF11B,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人Osteoprotegerin/TNFRSF11B浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人Osteoprotegerin/TNFRSF11B的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。
相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.051 | 0.049 | 0.050 | |
62.5 | 0.103 | 0.102 | 0.103 | 0.053 |
125 | 0.148 | 0.145 | 0.147 | 0.097 |
250 | 0.233 | 0.237 | 0.235 | 0.185 |
500 | 0.408 | 0.412 | 0.410 | 0.360 |
1000 | 0.707 | 0.699 | 0.703 | 0.653 |
2000 | 1.320 | 1.226 | 1.273 | 1.223 |
4000 | 2.241 | 2.119 | 2.180 | 2.130 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Osteoprotegerin/TNFRSF11B的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 16 | 16 | 16 | 12 | 12 | 12 |
平均值(pg/ml) | 3531.8 | 846.3 | 184.6 | 2041.7 | 632.1 | 138.2 |
标准差 | 250.76 | 66.01 | 13.48 | 157.21 | 46.78 | 10.92 |
变异系数(%) | 7.1 | 7.8 | 7.3 | 7.7 | 7.4 | 7.9 |
科研工具箱
别称
OPG; TR1; OCIF; PDB5; MGC29565
基因ID
Gene ID: 4982
功能
骨保护素(Osteoprotegerin, OPG)是一种分子量为 55-60 KDa 的分泌性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)受体蛋白,又称破骨细胞发生抑制因子(OCIF)或肿瘤坏死因子受体超家族成员11B(TNFRSF11B),具有抑制破骨细胞的功能。人 OPG 的 cDNA 编码401 个氨基酸(aa),包括一个 21 个 aa 的信号肽和一个 380 个 aa 的成熟可溶性蛋白,含有四个 TNFR 结构域,两个死亡结构域和一个肝素结合区域。富含半胱氨酸的 TNFR 结构域对配体间相互作用至关重要,而位于 C 末端的半胱氨酸可介导同型二聚。人的 OPG 与小鼠、大鼠、马、犬和牛的 OPG 氨基酸序列分别具有 86%、87%、92%、92%和 88%的一致性。OPG 作为同源二聚体在间充质干细胞、成纤维细胞和内皮细胞中广泛表达和组成性释放。OPG 作为诱饵受体可以与 RANK 竞争性结合 RANKL,从而阻断破骨细胞的分化成熟,抑制破骨细胞的骨吸收功能。在成骨细胞中,OPG 的基本结构域与高尔基体中 RANK L 的相互作用抑制了 RANK L 的分泌。在细胞外,OPG 与 RANK L 结合导致网格蛋白介导的这两种蛋白的内化和降解。在多发性骨髓瘤细胞中多配体聚糖-1 肝素硫酸盐与 OPG 结合也会导致 OPG 的内化和降解,导致骨质流失。OPG 缺乏可导致未成年人 Paget 病,OPG 与 RANK L 和 RANK 的平衡不足可在小鼠和人类中产生骨质疏松和血管钙化。除此之外,骨保护素还在类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、糖尿病、免疫系统疾病及肿瘤等疾病的治疗中也具有举足轻重的作用,临床应用十分广泛,越来越受到人们的重视。
研究领域
心血管生物学;免疫学;信号转导;代谢生物学