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产品概述
QuantiCyto® Mouse CD40 Ligand/TNFSF5 ELISA kit
Mouse
46.88pg/ml
93.75-6000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Mouse CD40 Ligand/TNFSF5浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Mouse CD40L
不与小鼠CD40、CD27L、CD30L 等反应
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗小鼠CD40L单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的小鼠CD40L会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗小鼠CD40L抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗小鼠CD40L抗体与结合在单抗上的小鼠CD40L结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有小鼠CD40L，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，小鼠CD40L浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠CD40L的浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。
相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.067 | 0.069 | 0.068 | |
| 93.75 | 0.101 | 0.096 | 0.099 | 0.031 |
| 187.5 | 0.116 | 0.108 | 0.112 | 0.044 |
| 375 | 0.168 | 0.157 | 0.163 | 0.095 |
| 750 | 0.286 | 0.281 | 0.284 | 0.216 |
| 1500 | 0.581 | 0.573 | 0.577 | 0.509 |
| 3000 | 1.118 | 1.103 | 1.111 | 1.043 |
| 6000 | 2.157 | 2.149 | 2.153 | 2.085 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中小鼠CD40L的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值(pg/ml) | 4620.8 | 912.2 | 210.7 | 3785.0 | 870.9 | 188.3 |
| 标准差 | 374.28 | 72.06 | 16.22 | 295.23 | 66.19 | 15.44 |
| 变异系数(%) | 8.1 | 7.9 | 7.7 | 7.8 | 7.6 | 8.2 |
科研工具箱
别称
CD154; IGM; IMD3; TRAP; gp39; HIGM1; T-BAM; TNFSF5; hCD40L; CD40 Ligand; CD40LG; TNF-related activation protein
基因ID
Gene ID: 21947
功能
CD40L(也称TNFSF5、CD154、TRAP和gp39)，属于肿瘤坏死因子(TNF)家族，是一种三聚体蛋白，CD40/TNFRSF5的配体，以跨膜和可溶性形式表达。它在许多免疫细胞类型以及血管内皮细胞和平滑肌细胞中表达。它与抗原呈递细胞、血小板、内皮细胞和上皮细胞上的CD40结合，导致B细胞活化和T细胞依赖性体液免疫反应增强。研究表明，CD40L是B细胞上的II型跨膜蛋白，可触发B细胞分化、成熟和凋亡的重要信号；另外，CD40L可通过在T细胞上交联产生共刺激信号，从而与TCR/CD3连接和CD28共刺激一起增强IL-4和IL-10的产生，并促进干扰素-γ和TNF-α的产生。因此，CD40L在免疫应答中起重要作用，是炎症的主要靶点。 CD40L广泛存在于不同的动物中，小鼠与大鼠高度相似(93.85%)，但与人类和恒河猴差异较大，相似度分别为77.69%和77.31%。小鼠中CD40L蛋白可裂解为2种亚型，包括膜状肽(1-260a.a.)和可溶性肽(112-260a.a.)。
研究领域
免疫学；心血管生物学；干细胞
