产品概述
QuantiCyto® Human TNF-β ELISA kit
Human
3.9pg/ml
7.8-500pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human TNF-β 浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human TNF-β
与人GM-CSF, IL-8, IL-1β, TNF-α以及小鼠TNF-α重组蛋白反应
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗Human TNF-β 单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的Human TNF-β 会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗Human TNF-β 抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗Human TNF-β 抗体与结合在单抗上的Human TNF-β 结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有Human TNF-β ,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,Human TNF-β 浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Human TNF-β 的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。
相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.054 | 0.056 | 0.055 | |
7.8 | 0.148 | 0.169 | 0.159 | 0.104 |
15.6 | 0.228 | 0.263 | 0.246 | 0.191 |
31.25 | 0.358 | 0.422 | 0.390 | 0.335 |
62.5 | 0.711 | 0.753 | 0.732 | 0.677 |
125 | 1.212 | 1.157 | 1.185 | 1.130 |
250 | 1.632 | 1.797 | 1.715 | 1.660 |
500 | 2.204 | 2.359 | 2.282 | 2.227 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人TNF-β的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 16 | 16 | 16 | 12 | 12 | 12 |
平均值(pg/ml) | 436.8 | 116.7 | 30.9 | 403.5 | 109.6 | 28.4 |
标准差 | 33.20 | 8.40 | 2.44 | 32.68 | 8.11 | 2.19 |
变异系数(%) | 7.6 | 7.2 | 7.9 | 8.1 | 7.4 | 7.7 |
科研工具箱
别称
LT; TNFB; TNFSF1; TNLG1E; LTA; LT-alpha; Lymphotoxin alpha; TNFSF1B
基因ID
Gene ID: 4049
功能
1975年E.A. Carswell等人发现接种卡介苗的小鼠注射细菌脂多糖后,血清中出现一种能使多种肿瘤发生出血性坏死的物质,将其命名为肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF) 。TNF主要由活化的巨噬细胞,NK细胞及T淋巴细胞产生。1985年Shalaby把巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α,把T淋巴细胞产生的淋巴毒素(lymphotoxin,LT)命名为TNF-β。人类TNF-β分子由205个氨基酸残基组成,含34氨基酸残基的信号肽,成熟型TNF-β含有171个氨基酸,分子量为25kDa。人类TNF-β与TNF-α其DNA同源序列达56%,氨基酸水平上同源性为36%。TNF-α与TNF-β均以三聚体的形式结合相同的细胞表面受体。与TNF-α相似,TNF-β也有膜结合和可溶性两种形式:分泌到细胞外的可溶形式称为淋巴毒素α(LT-α),膜结合的淋巴毒素以LT-α和LT-β亚单位结合的复合物形式分布在细胞膜上。TNF-α与TNF-β具有许多相似的生物学功能,如对多种肿瘤细胞的杀伤作用,参与免疫反应的调节,诱导多种分化细胞的抗原表达等。但是两者的功能也存在一定的差异,有研究表明,TNF-β对早期肿瘤比对晚期肿瘤更有效,TNF-β的体内抗瘤效应需要机体的免疫细胞,尤其是B细胞的参与。TNF-β在肿瘤治疗的临床应用前景可能优于TNF-α。
研究领域
免疫学;信号转导;癌症生物学;神经科学