产品概述
QuantiCyto® Mouse Leptin ELISA kit
Mouse
3.91pg/ml
7.81-500pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Mouse Leptin浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Mouse Leptin
/
欣博盛QuantiCyto®ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗小鼠Leptin单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的小鼠Leptin会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗小鼠Leptin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗小鼠Leptin抗体与结合在单抗上的小鼠Leptin结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有小鼠Leptin,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,小鼠Leptin浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠Leptin的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 1.5 ng/支×2 支 | 1.5 ng/支×3 支 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
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已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.043 | 0.047 | 0.045 | |
7.81 | 0.132 | 0.123 | 0.128 | 0.083 |
15.63 | 0.204 | 0.194 | 0.199 | 0.154 |
31.25 | 0.338 | 0.329 | 0.334 | 0.289 |
62.5 | 0.571 | 0.564 | 0.568 | 0.523 |
125 | 0.960 | 0.949 | 0.955 | 0.910 |
250 | 1.458 | 1.448 | 1.453 | 1.408 |
500 | 2.235 | 2.227 | 2.231 | 2.186 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中小鼠Leptin的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
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样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 20 | 20 | 20 | 16 | 16 | 16 |
平均值(pg/ml) | 343.6 | 115.9 | 25.8 | 277.2 | 72.4 | 17.1 |
标准差 | 26.8 | 9.3 | 2.1 | 21.9 | 5.6 | 1.4 |
变异系数(%) | 7.8 | 8.0 | 8.1 | 7.9 | 7.7 | 8.0 |
科研工具箱
别称
LEP, OB, OBS, Obese protein, Obesity factor
基因ID
Gene ID: 16846
功能
小鼠瘦素(Leptin)由肥胖基因(ob gene)编码,主要由脂肪组织分泌。其cDNA序列编码一个由167个氨基酸残基组成的前体蛋白质,该前体包含一段21个氨基酸残基的信号肽。在蛋白质成熟过程中,信号肽被特异性切除,最终形成由146个氨基酸残基构成的成熟瘦素蛋白。小鼠瘦素蛋白与大鼠和人类的序列同源性分别约为96%和84%。 瘦素的生物学功能主要通过与靶细胞表面的瘦素受体结合而实现。瘦素受体在下丘脑中与体重调节相关的关键区域(如下丘脑弓状核等)高度表达,这是其发挥体重调控作用的核心部位。此外,瘦素受体还广泛存在于外周组织中,包括T淋巴细胞、血管内皮细胞、胰腺β细胞、脂肪细胞等。瘦素对体重的调控是其最主要的生理功能,该作用主要通过作用于下丘脑中控制摄食行为、饥饿感、体温及能量消耗的中枢区域实现。在代谢方面,它通过中枢神经系统间接抑制胰岛素分泌,并在外周组织中拮抗胰岛素信号通路,促进脂肪酸氧化,参与糖脂代谢调节。在生殖发育方面,瘦素对青春期发育及生育能力至关重要,可促进生育相关生理过程的正常进行。此外,瘦素还能促进造血、血管生成及伤口愈合,并积极参与炎症反应和免疫应答,调节机体的免疫功能状态。在脂肪细胞内部,瘦素的表达受到多种因子的调控,其中TNF-α和IL-1β可抑制其表达,而胰岛素和糖皮质激素等激素则可促进其表达,形成复杂的调控网络。在小鼠模型中,肥胖基因发生突变会导致瘦素无法合成,这类突变小鼠表现出典型的病理表型,包括严重肥胖、糖尿病,同时伴有活动能力下降、代谢速率减缓及体温降低等症状。
研究领域
信号转导;神经科学;干细胞与再生医学;心血管生物学;代谢生物学