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产品概述
QuantiCyto® Human Granzyme B ELISA kit (High Sensitivity)
Human
2.0pg/ml
3.9-250pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组 Human Granzyme B 浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组 Human Granzyme B
不与其他细胞因子和蛋白等反应
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗人Granzyme B单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的人Granzyme B会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Granzyme B抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗人Granzyme B抗体与结合在单抗上的人Granzyme B结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有人Granzyme B，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，人Granzyme B浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人Granzyme B的浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 1.5 ng/支×2 支 | 1.5 ng/支×3 支 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.061 | 0.065 | 0.063 | |
| 3.9 | 0.116 | 0.11 | 0.113 | 0.050 |
| 7.8 | 0.149 | 0.14 | 0.145 | 0.082 |
| 15.6 | 0.234 | 0.228 | 0.231 | 0.168 |
| 31.3 | 0.398 | 0.389 | 0.394 | 0.331 |
| 62.5 | 0.758 | 0.751 | 0.755 | 0.692 |
| 125 | 1.442 | 1.434 | 1.438 | 1.375 |
| 250 | 2.391 | 2.384 | 2.388 | 2.325 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Granzyme B的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 24 | 24 | 24 | 16 | 16 | 16 |
| 平均值(pg/ml) | 189.6 | 55.8 | 12.1 | 10.7 | 41.3 | 8.4 |
| 标准差 | 15.0 | 4.5 | 0.9 | 0.8 | 3.3 | 0.6 |
| 变异系数(%) | 7.9 | 8.0 | 7.8 | 7.7 | 8.0 | 7.6 |
科研工具箱
别称
GZMB, C11; HLP; CCPI; CGL1; CSPB; SECT; CGL-1; CSP-B; CTLA1; CTSGL1
基因ID
Gene ID: 3002
功能
Granzyme B 属于丝氨酸蛋白酶Granzyme家族，他们特异性存在于细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK)的细胞毒素颗粒中作为两种主要的细胞毒性淋巴细胞(CL)，CTL和NK是针对细胞内病原体和转化细胞天然和获得性免疫关键组成细胞。Granzyme B通过CL分泌颗粒组分在胞外释放，同时在穿孔素辅助下，能进入目标细胞基质中引发细胞死亡，由于它在颗粒介导的凋亡中必不可少，在针对细菌和病毒感染过程中Granzyme B可能发挥重要作用。在基质中Granzyme B能识别的指标包括caspases，BID，核纤层蛋白，多聚(ADP-核糖)聚合酶、神经元谷氨酸受体和人软骨蛋白聚糖等。 Granzyme B作为鉴定人基因组的五个Granzymes A,B,H,K,M中的一种，是由247个氨基酸残基组成的前体，包括信号序列 (1-18位残基)，前导胀 (19-20位残基) 和一段成熟链 (21-247位残基)，人的Granzyme B与犬类，大鼠和小鼠的相似物的序列同源性分别为71%，69% 和 68%。一旦进入毒素颗粒中，Granzyme B能完全进入成熟链并且成为一个活性蛋白酶，其活性能被丝氨酸蛋白酶抑制剂B9抑制。
研究领域
细胞生物学;免疫学;神经科学
