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产品概述
QuantiCyto® Human TWEAK ELISA kit
Human
7.8pg/ml
15.6-1000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组 Human TWEAK 浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组 Human TWEAK
不与EDA-A2, LTα2/b1, APRIL, LIGHT, TNFα, 4-1BB/Fc Chimera, Fas Ligand,TRANCE, OX40 Ligand, GITR Ligand, TRAIL 等发生交叉反应
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗人TWEAK单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的人TWEAK会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人TWEAK抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗人TWEAK抗体与结合在单抗上的人TWEAK结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有人TWEAK，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，人TWEAK浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人TWEAK的浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以实际说明书为准 | 请以实际说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用体稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。
相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.063 | 0.066 | 0.065 | |
| 15.6 | 0.108 | 0.105 | 0.107 | 0.042 |
| 31.25 | 0.152 | 0.145 | 0.149 | 0.084 |
| 62.5 | 0.230 | 0.223 | 0.227 | 0.162 |
| 125 | 0.404 | 0.383 | 0.394 | 0.329 |
| 250 | 0.644 | 0.699 | 0.672 | 0.607 |
| 500 | 1.163 | 1.129 | 1.146 | 1.082 |
| 1000 | 2.229 | 2.059 | 2.144 | 2.080 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人TWEAK的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值(pg/ml) | 753.8 | 234.9 | 59.3 | 601.5 | 214.3 | 52.1 |
| 标准差 | 55.03 | 18.32 | 4.27 | 47.52 | 16.29 | 3.91 |
| 变异系数(%) | 7.3 | 7.8 | 7.2 | 7.9 | 7.6 | 7.5 |
科研工具箱
别称
TNFSF12; APO3L; DR3LG; MGC129581; MGC20669; TNF-related weak inducer of apoptosis
基因ID
Gene ID: 8742
功能
TWEAK是一种II型跨膜蛋白质，属于TNF超家族。该蛋白质含有一个较短的胞内结构域（1-18aa）,一个跨膜结构域（19-42aa）和一个胞外结构域（43-249aa）。人和鼠TWEAK的胞外结构域具有89%的氨基酸序列同一性。与膜结合的TWEAK蛋白分子在Arg93位点后发生水解，产生可溶性的TWEAK，由此表明TWEAK可能具有远程作用效应。TWEAK广泛表达于多种组织和细胞中。目前至少已鉴定出两种受体可与TWEAK结合。死亡受体3（Death receptor, DR3）,亦称为TNFRSF12, Apo-3, LARD, WSL-1或TRAMP，为TNF受体超家族成员，优势表达于高含量淋巴细胞的组织。研究表明TWEAK-DR3相互作用细胞死亡的诱导参与NF-κB转录因子的激活。在缺少DR3的细胞，则通过另一个由TWEAK诱导的细胞死亡替代途径，该途径由不同于DR3的受体介导完成。TWEAK受体（TWEAKR或称为FN14）是TNF受体超家族成员，其也可与TWEAK结合。该基因受有丝分裂原诱导表达，主要表达于成纤维细胞、原发性肝癌细胞和内皮细胞。TWEAK-TWEAKR相互作用在内皮细胞生长和迁移过程中发挥重要作用，TWEAK的这一效应不受VEGF的上调所介导。
研究领域
细胞生物学;癌症生物学
