产品概述
QuikCyto® Human Perforin ELISA kit (Quick Test)
Human
19.5pg/ml
39-2500pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
2h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Perforin浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Perforin
不与重组人IL-1β,IL-2,IL-3,IFN-γ,TNFα,Fas,Fas-L, TRAIL等反应
欣博盛QuikCyto® 快速检测ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Perforin单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Perforin会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Perforin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Perforin抗体与结合在单抗上的人Perforin结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Perforin,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人Perforin浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人Perforin的浓度。
本产品仅供科研使用,不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以随货说明书为准 | 请以随货说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃保存,请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 |
未用完的板条放回带拉链铝箔袋,密封好。 4℃条件下可储存1个月左右。 |
| 标准品 |
冻干粉 -20℃可储存6个月左右。 复溶后标准品使用后立即丢弃。 |
|
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液 4℃可储存1个月左右,稀释后即用即弃。 | |
| 浓缩酶结合物(避光) | ||
| 标准品&标本通用稀释液 |
4℃条件下,可储存 1 个月左右。 开瓶后密封好防止污染。 |
|
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物(避光) | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液 20× |
备注:所有试剂的批号见标签。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.082 | 0.086 | 0.084 | |
| 39.1 | 0.126 | 0.121 | 0.124 | 0.040 |
| 78.1 | 0.158 | 0.149 | 0.154 | 0.070 |
| 156.3 | 0.225 | 0.216 | 0.221 | 0.137 |
| 312.5 | 0.402 | 0.388 | 0.395 | 0.311 |
| 625 | 0.715 | 0.708 | 0.712 | 0.628 |
| 1250 | 1.362 | 1.353 | 1.358 | 1.274 |
| 2500 | 2.361 | 2.346 | 2.354 | 2.270 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Perforin的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值(pg/ml) | 5884.2 | 1652.9 | 333.8 | 3025.9 | 821.4 | 220.1 |
| 标准差 | 459.0 | 125.6 | 26.4 | 233.0 | 65.7 | 17.8 |
| 变异系数(%) | 7.8 | 7.6 | 7.9 | 7.7 | 8.0 | 8.1 |
科研工具箱
别称
P1; PFP; HPLH2; FLH2; Cytolysin; PGFL; PLGF
基因ID
Gene ID: 5551
功能
穿孔素(Perforin),又称PRF或PRF1。人的Perforin信号肽为20个氨基酸,经过内质网的加工后,释放成熟的Perforin,其溶细胞活性主要位于N端的前34个氨基酸上。Perforin的结构和功能与补体成分9(C9)相似,可形成跨膜小管,非特异性的溶解多种靶细胞。Perforin是溶细胞颗粒中主要的溶细胞蛋白,是T细胞和自然杀伤细胞调节的溶细胞作用的主要效应分子。Perforin主要存在于细胞毒性T细胞(CTLs)和NK细胞,这些细胞脱颗粒后Perforin插入靶细胞的细胞膜形成小孔,Perforin插入细胞膜溶细胞的区域为MACPF,这个区域与革兰氏阳性菌来源的胆固醇依赖性融细胞素同源。
研究领域
免疫学
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