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产品概述
QuikCyto® Porcine TNF-α ELISA kit (Quick Test)
Porcine
15.63pg/ml
31.25-2000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Porcine TNF-α浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Porcine TNF-α
不与human TNF-β，human和mouse TNF RI，TNF RII，rat TNF-α反应
欣博盛QuikCyto® 快速检测ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗猪TNF-α单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的猪TNF-α会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗猪TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗猪TNF-α抗体与结合在单抗上的猪TNF-α结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有猪TNF-α，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，猪TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中猪TNF-α的浓度。
本产品仅供科研使用，不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 请以随货说明书为准 | 请以随货说明书为准 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 冻干粉-20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 浓缩液4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
文件下载
实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.058 | 0.061 | 0.060 | |
| 31.25 | 0.105 | 0.100 | 0.103 | 0.043 |
| 62.5 | 0.145 | 0.138 | 0.142 | 0.082 |
| 125 | 0.231 | 0.220 | 0.226 | 0.166 |
| 250 | 0.429 | 0.417 | 0.423 | 0.364 |
| 500 | 0.763 | 0.750 | 0.757 | 0.697 |
| 1000 | 1.363 | 1.351 | 1.357 | 1.298 |
| 2000 | 2.274 | 2.266 | 2.270 | 2.211 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中猪TNF-α的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值(pg/ml) | 1423.6 | 386.5 | 96.7 | 1125.8 | 312.1 | 75.9 |
| 标准差 | 111.0 | 29.8 | 7.7 | 88.9 | 25.0 | 6.1 |
| 变异系数(%) | 7.8 | 7.7 | 8.0 | 7.9 | 8.0 | 8.1 |
科研工具箱
别称
APC1 protein; Cachectin; Cachetin; DIF; TNF; TNFA; TNF-A; TNFalpha; TNF-alpha; TNFG1F; TNFSF1A; TNFSF2; tumor necrosis factor alpha; Tumor necrosis factor ligand superfamily member 2; tumor necrosis factor; tumor necrosis factor-alpha
基因ID
Gene ID: 397086
功能
肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor alpha ,TNF-α），也称恶液质素，是TNF配体超家族的成员之一，曾被命名为TNFSF1A。TNF-α对某些肿瘤的生长有抑制作用，并作为免疫调节剂在炎症反应和宿主抗感染中起到重要的作用。TNF-α主要由活化的巨噬细胞产生，其他猪细胞类型，包括NK细胞，角质形成细胞，血管平滑肌细胞和颗粒黄体素细胞等也可以产生TNF-α。 猪TNF-α分子是由232个氨基酸（aa）残基组成的II型膜糖蛋白，包含35aa的胞质结构域，21aa的氨基酸的跨膜结构域和178aa的胞外结构域。在TNF-α转换酶（TACE，ADAM17）的作用下，由156个氨基酸残基组成的可溶性TNF-α从膜蛋白的C-末端释放，具有生物活性的TNF-α以三聚体的形式存在。猪TNF-α在小鼠细胞中呈阳性表达，分别与人和小鼠TNF-α具有89％和79％的氨基酸序列同源性。 目前已知有两种TNF受体，I型(type B, p55或TNFRSF1A)和II型(typeA, p75, or TNFRSF1B)，特异性的结合TNF-α和TNF-β。两个TNF受体在胞外的氨基酸序列具有同源性，而在胞质区域则没有，这使得两个受体具有不同的信号转导通路。在人和小鼠的血清中已发现两种受体的可溶形式，这些可溶性受体可以中和肿瘤坏死因子的生物活性，调节肿瘤坏死因子的活性。
研究领域
免疫学；信号转导；干细胞与再生医学；微生物学；癌症生物学；心血管生物学；神经科学；代谢生物学
