ELISA标准曲线是结果计算的标尺，因此标准品的把控ELISA实验成功与否的关键点。怎样正确溶解、稀释标准品呢？
实验开始前，需要将标准品溶解为按照说明书要求的浓度，再按照不同浓度稀释上样时使用。
→ 取出标准品，开盖前短暂离心（如：1000 rpm离心1min），将运输与存储过程中沾到管壁、管盖上的标准品落入管底。
→ 根据说明书要求加入一定体积的指定稀释液，室温静置溶解15 min，待其充分溶解后，轻轻吹打让其充分混匀。
→ 根据标准曲线推荐浓度进行稀释。
1. 准备6个干净的EP管，提前做好不同浓度标识（如S1-S6）。
2. 梯度稀释：根据说明书，每管加入等体积的标准品稀释液。吸取同体积溶解好的标准品至下一个浓度的S1管中，吹打10次混匀；从S1管中吸取同体积溶液到下一个浓度的 S2管中，吹打10次混匀。同法稀释至其他浓度。
注意：梯度稀释标准品时，稀释后可进行短暂的离心，让沾到EP管盖与管壁的液体落入管底，并由此进行下一个浓度的稀释。
以500 ul/管为例，用标准品&标本通用稀释液将复溶后的标准品母液进行倍比稀释，示意稀释方法如下图，也可根据实际用量来调整稀释体积，如200 ul/管。
3. 空白对照：标准品稀释液作为空白对照，即0浓度。
图1：标准曲线2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、0 pg/ml的稀释示例图，具体稀释浓度请以ELISA试剂盒随货说明书为准。
→ 复溶后的标准品原液，若有未使用完毕的，建议废弃。
